Quan sát Hình 2.4, hãy mô tả quy trình tách chiết DNA bằng phương pháp cột silica. Từ đó, hãy cho biết nguyên lí của phương pháp này là gì.
- Quy trình cơ bản tách chiết DNA bằng phương pháp cột silica gồm các bước:
+ Bước 1: Li giải tế bào.
+ Bước 2 - Gắn cột: Hỗn hợp chứa DNA thu được sau quá trình li giải sẽ được chuyển lên màng silica thông qua quá trình li tâm với tốc độ 13 000 vòng/phút, các thành phần còn lại sẽ đi qua màng và chuyển sang đáy ống li tâm. Tiến hành loại bỏ tạp chất và tách DNA ra khỏi dung dịch.
+ Bước 3 - Rửa: Loại bỏ các tạp chất để thu được DNA tinh sạch bằng ethanol (đối với mẫu sinh phẩm lấy từ vi khuẩn) hoặc bằng muối chaotropic và ethanol (đối với mẫu sinh phẩm lấy từ động, thực vật).
+ Bước 4 - Thu nhận DNA: Li tâm làm khô cột silica rồi tiến hành rửa giải để thu nhận DNA bằng dung dịch muối Tris 10mM ở pH 8 – 9 hoặc nước.
- Nguyên lí của tách chiết DNA bằng phương pháp cột silica là sử dụng các muối chaotropic có vai trò hỗ trợ cho quá trình liên kết giữa DNA với các hạt silica và được giữ lại, các thành phần khác (polysaccharide, protein,...) không thể gắn lên màng sẽ bị loại bỏ để thu nhận DNA tinh sạch.
Chuyên đề Sinh học 12 Chân trời sáng tạo Bài 2: Tách chiết DNA từ tế bào
Tách chiết DNA bằng phương pháp tủa có những ưu điểm và hạn chế gì?
Quan sát Hình 2.2, cho biết mục đích và cơ chế của quá trình li giải tế bào.
Nếu bỏ qua bước làm khô cột silica thì sẽ gây khó khăn gì cho quá trình thu nhận DNA?
Để đảm bảo quá trình tách chiết DNA thành công, các nhà khoa học cần quan tâm đến một số yếu tố sau:
- Quá trình li giải tế bào;
- Nồng độ ethanol được sử dụng;
- Quá trình gắn DNA lên màng silica (trong phương pháp cột silica);
- Mẫu DNA bị nhiễm protein.
Hãy cho biết các yếu tố trên ảnh hưởng như thế nào đến quá trình tách chiết DNA.
Hầu hết các nghiên cứu và ứng dụng sinh học phân tử như giải trình tự gene, nhân dòng gene, tạo thư viện DNA,... đều cần phải thu nhận được một lượng DNA đủ lớn, đủ sạch và ở trạng thái nguyên vẹn. Bằng phương pháp nào mà các nhà khoa học có thể thu nhận được các phân tử DNA như mong muốn?
Quan sát Hình 2.1, hãy mô tả quy trình cơ bản tách chiết DNA từ tế bào. Từ đó, hãy cho biết nguyên lí của phương pháp tách chiết DNA.
CÔNG TY TNHH ĐẦU TƯ VÀ DỊCH VỤ GIÁO DỤC VIETJACK
- Người đại diện: Nguyễn Thanh Tuyền
- Số giấy chứng nhận đăng ký kinh doanh: 0108307822, ngày cấp: 04/06/2018, nơi cấp: Sở Kế hoạch và Đầu tư thành phố Hà Nội.
2021 © All Rights Reserved.